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食用菌栽培实验讲义

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实验一 食用菌栽培种培养基的制备
1、原理: 母种?原种?栽培种。木腐生菌棉籽壳菌种基 础配方:棉籽壳58~68%,木屑10~20%,麸皮或米糠 10~20%,CaCO31.5%,石灰0.5%,pH自然。 2、材料及工具: 棉籽壳90%,麸皮10%; 聚丙烯塑料袋15*28cm,锥形木棒(直径2cm), 丁字压实耙,刻度瓷缸,天*,铝锅,包扎绳,剪刀, 棉花塞。

3、方法: (1)按配方取料:一袋菌种所需培养料干重约0.2kg。实 验 分 6 组 , 每 组 3 袋 , 共 18 袋 , 所 需 总 干 重 18*0.2=3.6kg=7.2斤,实验按8斤计算,包含8两麸皮, 7.2斤棉籽壳。 (2)干料干混: (3)可溶性材料兑水(该步可省)。 (4)含水量调节:控制60%。8斤料加水6kg(6L)。手握法 判断:握捏指缝间现水迹,指捏水迹欲滴,含水量为 60%。 (5)分装:先填少许料于袋角和袋底,埋入木棒于袋中心, 边填料边压实,要求上紧下松,袋壁*滑。填料高度 至袋长的一半,将袋倒置不落料为度。 (6)塞棉塞、扎口、贴标签:没有套环,以绳代替。 (7)称重(该步可选); (8)高压灭菌(121℃,1h),冷却。

实验二 食用菌栽培种的接种
一、原理: 原种?栽培种。 二、材料及工具: *菇母种,栽培种培养基,接种 耙,记号笔。 三、方法: 1、接种室空间消毒:紫外灯照1h 。 2、启动超净工作台,点燃酒精灯:打开超净工作台 电源开关,照明开关及鼓风机开关。 3、消毒:手、接种工具及接种材料。

4、接种: (1)接种工具火焰灭菌: (2)拔试管塞、火焰封口:先将栽培种袋绳子解开, 拔棉塞,拔试管塞,火焰封口。 (3)接种:用接种耙将母种分成几块,试管管口火 焰灭菌后,将菌种移至栽培种培养基。培养基表面 和洞穴内要均匀分布菌种块。一支母种接种一袋栽 培种。 (4)塞棉塞、扎口。 5、写标签:菌种名、接种小组、接种者、接种日期。 6、菌种培养:25℃。一个月左右菌丝满袋,菌龄控 制在30~35天内适合生产用。或通过控制环境条件, 促使出菇。

实验三 食用菌母种培养基的制备
1、原理: 母种培养基配方很多,PDA最常用,适用于绝大部分食 用菌的分离、培养与保藏。PDA培养基:(去皮)马铃薯 200g,葡萄糖或蔗糖20g,琼脂20g,水1000mL。 2、材料及工具: 马铃薯、白糖、琼脂条; 试管、试管塞、(刻度)瓷缸、玻璃漏斗、纱布、电磁炉、 天*等。 3、方法: (1)培养基配方确定:PDA。 每小组制备100mL PDA,需马铃薯20g,白糖2g,琼脂2g, 水100mL。

(2)不溶物热浸提: 称取去皮马铃薯20g,切成块状(蚕豆大小),加水 150mL,煮沸20~30min至薯块发软发白为度,过滤,取清 液。煮沸过程中防止水溢出和烧干。 (3)琼脂热熔:琼脂条撕碎,搅拌至完全熔化。 (4)加糖:2g。 (5)定容:至100mL。电磁炉关闭开关后经几分钟散热,才能拔插头。 (6)分装: 趁热分装,分装要迅速,防止凝固。分装量为试管容量 的1/4。分装时避免培养液沾粘试管口。 (7)塞试管塞: (8)高压灭菌:121℃,30min。 (9)冷却、摆斜面:趁热摆斜面,斜面长度为试管长度的3/5。

实验四 食用菌菌种的分离——组织分离法 一、原理: 即母种分离。包括组织分离法,孢子分离 法和基内菌丝分离法。 二、材料及工具: *菇子实体,PDA培养基,解剖刀,接种 钩,记号笔。 三、方法: 1、接种室空间消毒:紫外灯照1h。

2、启动超净工作台,点燃酒精灯。 3、消毒:手、接种钩、*菇表面、试管表面。 4、组织分离:将*菇纵向撕成两半,在子实体 纵剖面菌柄与菌盖的交接处用灭菌解剖刀划 井字形的小方块,用接种钩钩取小方块移到 PDA培养基中央。 5、写标签:菌种名、接种小组、接种者、接种 日期。 6、菌种培养:25℃。待菌丝长出后,经过纯 化即可获得*菇母种。



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